Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
myogenin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400176
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- myogenin Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico myogenin, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: myogenin Antibody (5FD): sc-52903
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
myogenin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-400176 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
MYOG codifica la miogenina, un fattore di trascrizione basic helix-loop-helix (bHLH) che guida la differenziazione terminale del muscolo scheletrico coordinando l’uscita dei mioblasti dal ciclo cellulare e l’attivazione dei programmi genici delle proteine strutturali muscolari. La miogenina agisce all’interno del nucleo della rete dei fattori regolatori miogenici insieme a MYOD1 e MYF5, e integra segnali di sviluppo provenienti da vie di segnalazione come WNT, NOTCH e TGF-β/SMAD per definire l’impegno di linea e la maturazione. Si lega a motivi E-box per regolare programmi trascrizionali associati alla miofibrillogenesi, al rimodellamento metabolico e allo sviluppo neuromuscolare. L’espressione deregolata di MYOG e la circuiteria trascrizionale miogenica vengono utilizzate come readout molecolari negli studi sul deperimento muscolare, sulla rigenerazione compromessa e sui meccanismi delle malattie neuromuscolari.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO myogenin (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MYOG in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MYOG insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MYOG a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina myogenin.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MYOG per lo studio della segnalazione di myogenin, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni MYOG critici per la funzione di myogenin
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MYOG per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal myogenin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal myogenin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MYOG. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal myogenin Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR myogenin (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MYOG per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MYOG definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.