



Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mucolipin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430117-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mucolipin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-430117-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mcoln1 codifica a mucolipina 1 (TRPML1), um canal catiônico endolisossomal permeável a Ca2+ que regula a homeostase iônica lisossomal, o tráfego de membranas e a dinâmica de fusão–fissão. Ao acoplar a liberação de Ca2+ do lúmen a efetores a jusante, a TRPML1 sustenta o fluxo da via autofagia–lisossomo, o processamento de cargas endocíticas e a exocitose lisossomal, importantes para a depuração celular e a detecção de nutrientes. A sinalização dependente de Mcoln1 se cruza com respostas ao estresse lisossomal e programas de transporte vesicular que influenciam o controle de qualidade mitocondrial e a sinalização inflamatória. A disfunção da TRPML1 está associada a patologia de armazenamento lisossomal e a fenótipos neurodegenerativos, tornando Mcoln1 um alvo-chave para estudos mecanísticos de disfunção endolisossomal em modelos murinos.
mucolipin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mcoln1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mcoln1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mcoln1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mcoln1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.