MRGX2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (r): sc-437369

Panoramica

MRGX2 (indicato anche come membro della famiglia MRGPRX2) codifica un recettore accoppiato a proteine G correlato a Mas, che partecipa alla comunicazione neuro-immunitaria e alla segnalazione dipendente dallo stimolo. Nei roditori, i recettori simili a MRGX2 sono collegati a processi associati ai neuroni sensoriali e ai mastociti, con accoppiamento a vie a valle che regolano la mobilizzazione del calcio intracellulare, i programmi di degranulazione e il rilascio di mediatori infiammatori. In quanto GPCR, MRGX2 influenza reti di trasduzione del segnale sulla superficie cellulare che intersecano l’infiammazione neurogena legata a stress e dolore, rendendolo rilevante per studi meccanicistici su prurito, nocicezione e risposte pseudo-allergiche. Un’attività disregolata in questa famiglia di recettori è stata associata a una reattività alterata dei mastociti e a fenotipi infiammatori in modelli preclinici.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MRGX2 (r) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari rat. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MRGX2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di MRGX2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di MRGX2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MRGX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r) e dal MRGX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MRGX2 Plasmide HDR (r) e il plasmide HDR MRGX2 (r2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.