Plásmido Doble Nickase (h) MOZ: sc-403564-NIC

KAT6A (MOZ) codifica una acetiltransferasa de histonas de la familia MYST que acetila principalmente la histona H3 (incluidas H3K9 y H3K14) para promover una cromatina abierta y la activación transcripcional. MOZ actúa en complejos multiproteicos reguladores de la cromatina y coordina la actividad de potenciadores y promotores que influye en la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y programas de expresión génica específicos de linaje. En contextos hematopoyéticos y del desarrollo, KAT6A ayuda a mantener estados transcripcionales necesarios para la autorrenovación y la diferenciación de progenitores. La desregulación de KAT6A mediante mutaciones, alteraciones de dosis o reordenamientos cromosómicos se ha vinculado con un control transcripcional aberrante y con fenotipos oncogénicos o del neurodesarrollo, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos centrados en epigenética.

MOZ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KAT6A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KAT6A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KAT6A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KAT6A alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.