Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Mitofilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429376
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mitofilin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mitofilin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mitofilin Anticorpo (D-3): sc-390707
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mitofilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429376 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Immt de camundongo codifica a mitofilina, um componente central do complexo MICOS (sistema organizador de sítios de contato mitocondriais e cristas), que mantém a arquitetura da membrana interna mitocondrial e a formação das junções das cristas. A mitofilina sustenta a ultraestrutura mitocondrial, coordena os contatos entre as membranas interna e externa e influencia a importação de proteínas e a organização da cadeia respiratória, aspectos importantes para a fosforilação oxidativa. A disrupção de IMMT perturba a morfologia das cristas, a dinâmica mitocondrial e a homeostase bioenergética — processos amplamente implicados em neurodegeneração, cardiomiopatia, disfunção metabólica e adaptação de células cancerosas. Como um ponto de convergência do acoplamento entre estrutura e função mitocondrial, Immt é frequentemente estudado em vias que regulam a sensibilidade à apoptose, a mitofagia e as respostas celulares ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mitofilin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Immt em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Immt, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Immt na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mitofilin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Immt para a investigação da sinalização de Mitofilin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Immt críticos para a função Mitofilin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Immt para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mitofilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mitofilin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Immt. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mitofilin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mitofilin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Immt para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Immt definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.