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| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido CRISPR de Activación (h) MIA3 | sc-403994-ACT | 20 µg | $397.00 |
La MIA3 humana (miembro 3 de la familia de actividad inhibidora del melanoma), también conocida como TANGO1, es una proteína andamio residente del retículo endoplásmico (RE) esencial para organizar los sitios de salida del RE y acoplar el ensamblaje de la cubierta COPII a la secreción de carga voluminosas. Al coordinar la carga de proc colágeno y la biogénesis de vesículas, MIA3 favorece el depósito de matriz extracelular y la homeostasis tisular, vinculando la proteostasis del RE con la capacidad de la vía secretora. El tráfico dependiente de MIA3 se interseca con la biosíntesis de colágeno, la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas y los programas de remodelación del estroma. La actividad desregulada de MIA3 se ha asociado con una organización alterada de la matriz y con fenotipos de estrés secretor relevantes para la fibrosis, defectos del desarrollo y la biología del microambiente tumoral.
MIA3 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de MIA3 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.
MIA3 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus MIA3 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.
Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional MIA3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de MIA3. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo MIA3 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de MIA3 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía MIA3 en células tumorales con expresión de MIA3 silenciada o reducida.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.