Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MCH-1R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402512
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCH-1R O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MCH-1R, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MCH-1R Anticorpo (52-W7): sc-100327
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCH-1R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402512 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MCHR1 codifica o receptor 1 do hormônio concentrador de melanina (MCH-1R), um GPCR de classe A que se liga ao neuropeptídeo MCH e regula a sinalização neuronal envolvida na homeostase energética, no comportamento alimentar, no estado de vigília e em processos relacionados ao humor. Após a ativação, o MCH-1R acopla-se principalmente às vias Gi/o e Gq para modular o AMPc intracelular, a sinalização da fosfolipase C, o fluxo de cálcio e cascatas de quinases a jusante, como ERK/MAPK. A atividade do receptor influencia a transmissão sináptica e as saídas neuroendócrinas em circuitos hipotalâmicos e límbicos. A desregulação da sinalização de MCHR1 tem sido associada a fenótipos metabólicos, incluindo obesidade e resistência à insulina, bem como a características neuropsiquiátricas relevantes para pesquisas sobre ansiedade e depressão.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MCH-1R (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MCHR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MCHR1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MCHR1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MCH-1R.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MCHR1 para a investigação da sinalização de MCH-1R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MCHR1 críticos para a função MCH-1R
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MCHR1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MCH-1R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MCH-1R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MCHR1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MCH-1R Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MCH-1R (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MCHR1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MCHR1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.