Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MAVS Plasmide Double Nickase (h): sc-400769-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MAVS Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MAVS Double Nickase Plasmid (h) e il MAVS Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAVS. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MAVS Antibody (E-3): sc-166583
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MAVS Plasmide Double Nickase (h) | sc-400769-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAVS Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400769-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAVS (proteina di segnalazione antivirale associata ai mitocondri) è un adattatore associato ai mitocondri che collega il rilevamento dell’RNA virale nel citosol da parte di RIG-I (DDX58) e MDA5 (IFIH1) alla segnalazione immunitaria innata a valle. Una volta attivata, MAVS nuclea complessi di segnalazione che promuovono l’attivazione di IRF3/IRF7 dipendente da TBK1/IKKε e la segnalazione canonica di NF-κB mediata da IKK, inducendo interferoni di tipo I e citochine pro-infiammatorie. L’attività di MAVS è regolata dalla dinamica mitocondriale e da modificazioni post-traduzionali, integrando le risposte cellulari allo stress con la difesa antivirale. Una segnalazione di MAVS deregolata è stata implicata in una suscettibilità antivirale alterata e in fenotipi infiammatori rilevanti per la biologia delle infezioni e per i meccanismi di malattie immuno-mediate.
MAVS Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAVS nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAVS. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAVS. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAVS interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.