MAP-1B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400981

Descripción general

MAP1B codifica la proteína asociada a microtúbulos 1B (MAP-1B), un regulador del citoesqueleto neuronal que se une a los microtúbulos y a complejos asociados a actina para favorecer el crecimiento de neuritas, la guía axonal y la dinámica del cono de crecimiento. MAP-1B contribuye a la estabilización de los microtúbulos, la remodelación del citoesqueleto y los procesos de transporte intracelular que dan forma a la polarización neuronal y a la formación de circuitos. Sus funciones dependientes de la fosforilación se intersectan con vías de señalización que regulan la plasticidad del citoesqueleto y el desarrollo sináptico. La desregulación de la expresión o la función de MAP1B se ha vinculado a mecanismos de enfermedades del neurodesarrollo y neurodegenerativas, lo que la convierte en un objetivo útil para estudiar las relaciones estructura–función en neuronas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MAP-1B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAP1B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAP1B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAP1B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MAP-1B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAP1B para la investigación de la señalización de MAP-1B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MAP1B críticos para la función de MAP-1B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAP1B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MAP-1B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MAP-1B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAP1B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MAP-1B (h) y el plásmido HDR MAP-1B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAP1B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAP1B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.