Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MAGE-C1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403336
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- MAGE-C1 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im MAGE-C1-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MAGE-C1: sc-53868
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MAGE-C1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-403336 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
MAGEC1 kodiert MAGE-C1, ein Cancer-Testis-Antigen aus der MAGE-Familie, das in normalen adulten Geweben nur eingeschränkt exprimiert wird, in malignen Zellen jedoch häufig hochreguliert ist. MAGE-C1 wird mit der Regulation der Proteinhomöostase in Verbindung gebracht, unter anderem durch Interaktionen mit E3-Ubiquitin-Ligase-Komplexen, wodurch es den ubiquitinierungsabhängigen proteasomalen Abbau sowie Signalkaskaden der Stressantwort beeinflusst. Eine aberrante Expression wurde mit Programmen zum Überleben von Tumorzellen, veränderter Apoptose und der Modulation von Signalwegen der Immunerkennung assoziiert. Als Linien- und tumorassoziierter Marker wird MAGE-C1 häufig im Kontext onkogener Signalgebung, der Antigenpräsentationsbiologie und der Mechanismen untersucht, die der zellulären Anpassung an proteotoxischen Stress zugrunde liegen.
Das MAGE-C1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MAGEC1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MAGEC1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MAGEC1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MAGE-C1-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MAGEC1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MAGE-C1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf MAGEC1-Exone abzielen, die für die MAGE-C1-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere MAGEC1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom MAGE-C1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MAGE-C1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MAGEC1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MAGE-C1 HDR-Plasmid (h) und MAGE-C1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MAGEC1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MAGEC1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.