MafB Lentiviral Activation Particles (h): sc-400554-LAC

Das humane Gen **MAFB** kodiert MafB, einen basischen Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor aus der großen Maf-Familie, der die Linienfestlegung und Programme der terminalen Differenzierung steuert. MafB reguliert die Identität von Makrophagen und Monozyten, die Osteoklastogenese sowie gewebsständige Immunfunktionen, indem es transkriptionelle Netzwerke koordiniert, die an inflammatorischer Signalgebung, Phagozytose und dem Umbau der extrazellulären Matrix beteiligt sind. In der Niere trägt MafB zur Reifung und Aufrechterhaltung von Podozyten bei; seine Fehlregulation wird mit Defekten der glomerulären Filtrationsbarriere und nephropathieassoziierten Phänotypen in Verbindung gebracht. Eine veränderte MAFB-Aktivität wurde zudem mit onkogenen transkriptionellen Zuständen und abweichender Differenzierung in hämatologischen sowie soliden Tumoren verknüpft, was MAFB zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische, pfadorientierte Studien macht.

MafB Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente MAFB-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

MafB Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der MAFB-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen MafB-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen MAFB-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.