LRP130 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402029-LAC

LRPPRC codifica a LRP130, uma proteína ligante de RNA associada à mitocôndria que coordena a regulação pós-transcricional da expressão gênica da organela ao estabilizar e processar mRNAs mitocondriais e ao promover sua poliadenilação e tradução. Por meio dessas atividades, a LRP130 sustenta a biogênese dos complexos de fosforilação oxidativa, a função do ribossomo mitocondrial e um controle mais amplo do metabolismo energético celular. Vias dependentes de LRPPRC se cruzam com a comunicação mitonuclear, com a remodelação adaptativa da respiração induzida por estresse e com o metabolismo de RNA dentro das mitocôndrias. Alterações na função de LRPPRC têm sido associadas a fenótipos de disfunção mitocondrial e a contextos de doenças neurometabólicas, tornando-a um alvo útil para estudos de bioenergética e de regulação gênica mitocondrial.

As Partículas de Ativação Lentivirais LRP130 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de LRPPRC numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais LRP130 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição LRPPRC, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de LRP130. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo LRPPRC e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.