非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
LRF 抗体 (13E9): sc-33683. 显示小鼠胚胎成纤维细胞中 LRF 蛋白表达的 Western 印迹分析. 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 Takahiro Maeda 博士友情提供.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421462
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在LRF/Pokemon基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：LRF/Pokemon: sc-33683，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421462 | 20 µg | $397.00 |
概述
Zbtb7a 编码 LRF/Pokemon，这是一种含 BTB/POZ 结构域的锌指转录因子，可通过序列特异性的 DNA 结合并招募共抑制复合物，调控细胞谱系决定、增殖与存活。在造血与免疫相关背景中，它有助于协调 B 细胞与 T 细胞的发育程序，影响红系成熟，并调节与分化相关的转录网络。LRF/Pokemon 还参与调控细胞周期检查点与应激反应的通路，包括对 ARF–p53 抑癌信号的功能性拮抗，并可在靶位点重塑染色质状态。Zbtb7a 活性异常已在血液系统及实体肿瘤模型中与致癌性转录程序和异常分化表型相关，使其成为研究肿瘤发生机制与细胞命运调控的重要节点。
LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Zbtb7a基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Zbtb7a基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Zbtb7a开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使LRF/Pokemon蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Zbtb7a缺失的细胞模型，用于LRF/Pokemon信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 LRF/Pokemon 功能至关重要的 Zbtb7a 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Zbtb7a 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Zbtb7a 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 LRF/Pokemon HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 LRF/Pokemon HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Zbtb7a同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Zbtb7a靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。