Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Limd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424343
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Limd1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Limd1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Limd1 Anticorpo (H-4): sc-271448
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Limd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424343 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O LIM domain containing 1 (Limd1) é uma proteína de ancoragem (scaffolding) que se localiza em adesões focais e em junções célula–célula, coordenando interações proteína–proteína que moldam a organização do citoesqueleto e a mecanotransdução. O Limd1 participa de vias que regulam a adesão celular, a migração e o controle do crescimento, e tem sido associado à regulação da sinalização Hippo/YAP por meio de interações que influenciam a atividade de LATS e a localização de YAP/TAZ. Em sistemas murinos, o Limd1 dá suporte a estudos de homeostase tecidual e de programas de desenvolvimento nos quais a sinalização dependente de adesão é crítica. A desregulação de redes associadas ao LIMD1 é relevante para a biologia de supressores tumorais e para fenótipos ligados à metástase, incluindo invasão alterada e processos semelhantes à transição epitélio–mesênquima.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Limd1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Limd1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Limd1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Limd1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Limd1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Limd1 para a investigação da sinalização de Limd1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Limd1 críticos para a função Limd1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Limd1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Limd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Limd1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Limd1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Limd1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Limd1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Limd1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Limd1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.