KLRG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409220

Descripción general

KLRG1 (receptor similar a lectina de células citotóxicas G1) es un receptor inhibidor expresado en subpoblaciones de células NK humanas y de células T efectoras/de memoria, donde ayuda a calibrar la citotoxicidad y la producción de citocinas durante la vigilancia inmunitaria. Al unirse a cadherinas como la E‑cadherina, KLRG1 transmite señales inhibitorias que influyen en los umbrales de activación, la diferenciación celular y características del agotamiento y la senescencia inmunitarios. KLRG1 se utiliza ampliamente como marcador para fenotipar poblaciones de linfocitos terminalmente diferenciadas y para seguir respuestas impulsadas por antígeno en infecciones crónicas, inflamación y microambientes tumorales. Por ello, un tono inhibidor asociado a KLRG1 desregulado es relevante para estudios de inmunosupresión, residencia tisular y vías tipo “checkpoint” que moldean la inmunidad antiviral y antitumoral.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KLRG1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLRG1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLRG1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLRG1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KLRG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLRG1 para la investigación de la señalización de KLRG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KLRG1 críticos para la función de KLRG1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLRG1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KLRG1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KLRG1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLRG1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KLRG1 (h) y el plásmido HDR KLRG1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLRG1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLRG1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.