KCTD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406758

Descripción general

KCTD1 (dominio de tetramerización del canal de potasio que contiene 1) codifica una proteína con dominio BTB/POZ implicada en redes de interacción proteína–proteína que influyen en el control transcripcional y en programas de diferenciación celular. Los miembros de la familia KCTD suelen funcionar como proteínas adaptadoras dentro de complejos de ligasa E3 de ubiquitina basados en Cullin3 (CUL3), conectando sustratos específicos con su degradación mediada por ubiquitina y, de este modo, modulando las salidas de señalización. A través de estas funciones reguladoras, KCTD1 se ha asociado con procesos del desarrollo y con el mantenimiento de la identidad celular, y su alteración genética se ha vinculado a trastornos congénitos que afectan a tejidos ectodérmicos. En investigación biomédica, KCTD1 se estudia en el contexto de la modulación de vías, la proteostasis y los circuitos reguladores génicos relevantes para fenotipos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KCTD1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KCTD1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KCTD1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KCTD1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KCTD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KCTD1 para la investigación de la señalización de KCTD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KCTD1 críticos para la función de KCTD1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KCTD1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KCTD1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KCTD1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KCTD1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KCTD1 (h) y el plásmido HDR KCTD1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KCTD1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KCTD1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.