Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
karyopherin α3 Antibody (B-1): sc-514101. Fluorescent western blot analysis of karyopherin α3 expression in HeLa (A), Jurkat (B) and NIH/3T3 (C) nuclear extracts, A-673 whole cell lysate (D) and human skeletal muscle tissue extract (E). Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgG1 BP-CFL 647: sc-533664.
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karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-410855
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- karyopherin α3 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在karyopherin α3基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：karyopherin α3: sc-514101，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-410855 | 20 µg | $397.00 |
概述
KPNA3 编码核转运蛋白 α3（karyopherin α3），它是 importin-α 家族的适配蛋白，能够识别经典核定位信号（NLS），并与 importin β 组装，介导 Ran GTPase 依赖的核—胞质运输，通过核孔复合体完成转运。通过调控转录因子、信号传递介质及其他货物蛋白进入细胞核，KPNA3 影响基因表达程序、细胞周期控制、应激反应以及先天免疫信号传导。在多种疾病背景中，涉及 importin 通路的核转运动力学改变与增殖失调、炎症信号异常以及宿主—病原体相互作用等现象相关。因此，KPNA3 是研究选择性货物输入如何塑造细胞表型与信号转导网络的一个有价值靶点。
karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中KPNA3基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对KPNA3基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏KPNA3开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使karyopherin α3蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建KPNA3缺失的细胞模型，用于karyopherin α3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 karyopherin α3 功能至关重要的 KPNA3 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 KPNA3 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 KPNA3 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 karyopherin α3 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 karyopherin α3 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由KPNA3同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定KPNA3靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。