JWA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406231
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- JWA El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico JWA, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
JWA Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406231 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ARL6IP5 codifica JWA, una proteína asociada a la membrana y sensible al estrés, implicada en la regulación de la organización del citoesqueleto, la adhesión celular y el tráfico vesicular. JWA se ha relacionado con la modulación de la señalización de MAPK y de las respuestas al estrés oxidativo, influyendo en procesos como la migración, la proliferación y la apoptosis. En células humanas, la alteración de la expresión de JWA se ha asociado con una señalización inflamatoria desregulada y con la biología tumoral, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la progresión del cáncer, fenotipos relacionados con la metástasis y la adaptación celular al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO JWA (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ARL6IP5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ARL6IP5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ARL6IP5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína JWA.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ARL6IP5 para la investigación de la señalización de JWA, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ARL6IP5 críticos para la función de JWA
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ARL6IP5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido JWA CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido JWA CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ARL6IP5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR JWA (h) y el plásmido HDR JWA (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ARL6IP5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ARL6IP5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.