Plasmide Double Nickase (h) JunB: sc-400493-NIC

JUNB code pour JunB, un facteur de transcription à fermeture éclair leucine au sein du complexe AP-1, qui intègre les voies de signalisation MAPK/ERK et JNK afin de réguler des programmes d'expression génique dépendants des stimuli. JunB module la progression du cycle cellulaire, la différenciation, ainsi que les réponses au stress et aux cytokines en s'associant à des protéines de la famille FOS et en se liant à des motifs AP-1 au niveau des enhancers et des promoteurs. Par ces réseaux, il influence l'activation des cellules immunitaires et la signalisation inflammatoire, et il est fréquemment utilisé comme indicateur de réponses transcriptionnelles immédiates et précoces. Une activité dérégulée de JUNB a été impliquée dans une reprogrammation transcriptionnelle oncogénique et des phénotypes immunitaires altérés, ce qui en fait une cible d'étude pertinente en biologie tumorale et dans les voies associées à l'inflammation.

JunB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus JUNB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de JUNB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de JUNB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de JUNB.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.