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| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-418946-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IRP-1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-418946-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Aco1 de camundongo codifica a proteína reguladora do ferro 1 (IRP-1), uma proteína citosólica bifuncional que alterna entre uma enzima aconitase e um regulador de ligação a RNA, dependendo do estado dos aglomerados ferro–enxofre na célula. Em sua forma de ligação a RNA, a IRP-1 reconhece elementos responsivos ao ferro (IREs) em mRNAs-alvo para coordenar a captação, o armazenamento e a utilização de ferro, modulando transcritos como o receptor de transferrina e a ferritina. Essa rede pós-transcricional integra-se à biogênese mitocondrial de ferro–enxofre, às respostas ao estresse oxidativo e à reprogramação metabólica durante a limitação de ferro. A atividade desregulada da IRP-1 perturba a homeostase do ferro e o equilíbrio redox, tornando o Aco1 um nó-chave para estudar fenótipos semelhantes à anemia, acúmulo de ferro associado à neurodegeneração e estresse metabólico ligado à inflamação em sistemas modelo.
IRP-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Aco1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Aco1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Aco1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Aco1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.