Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IRAK-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421100
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IRAK-1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IRAK-1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IRAK-1 Anticuerpo (F-4): sc-5288
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IRAK-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421100 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Irak1 codifica la quinasa 1 asociada al receptor de interleucina 1 (IRAK-1), una quinasa de serina/treonina que actúa como transductor central de señales aguas abajo de la activación del receptor de IL‑1 y de los receptores tipo Toll en células de la inmunidad innata de ratón. Tras la estimulación del receptor, IRAK-1 participa en la señalización dependiente de MyD88, coordinando el ensamblaje del complejo IRAK–TRAF6 para promover la activación de las vías de NF‑κB y MAPK y la consiguiente expresión de genes inflamatorios. IRAK-1 también contribuye a la regulación de la producción de citocinas, las respuestas de interferón y la comunicación cruzada con la señalización dependiente de ubiquitina y con procesos relacionados con el inflamasoma. La desregulación de la señalización de IRAK-1 es relevante en modelos experimentales de inflamación crónica y autoinmunidad, susceptibilidad a infecciones y fenotipos del microambiente tumoral asociados a inflamación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IRAK-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Irak1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Irak1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Irak1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IRAK-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Irak1 para la investigación de la señalización de IRAK-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Irak1 críticos para la función de IRAK-1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Irak1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IRAK-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IRAK-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Irak1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IRAK-1 (m) y el plásmido HDR IRAK-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Irak1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Irak1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.