Integrin β6/ITGB6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400999-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Integrin β6/ITGB6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Integrin β6/ITGB6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Integrin β6/ITGB6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ITGB6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Integrin β6/ITGB6 Anticorpo (C5): sc-517598
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Integrin β6/ITGB6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400999-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β6/ITGB6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400999-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB6 codifica a subunidade β6 da integrina, que se associa à integrina αv para formar o heterodímero αvβ6, restrito a epitélios, um mediador-chave da adesão célula–MEC e da mecanotransdução. A αvβ6 liga-se a ligantes que contêm RGD, como fibronectina e vitronectina, e pode ativar o TGF-β latente por meio da interação com o complexo LAP, conectando o ITGB6 à sinalização TGF-β/SMAD, à remodelação epitelial e ao crosstalk imune–estromal. Por meio da montagem de adesões focais e de vias a jusante, incluindo FAK/SRC, MAPK e PI3K, o ITGB6 influencia programas de migração, invasão e reparo de feridas. A expressão desregulada de ITGB6 tem sido associada a fibrose, inflamação crônica e múltiplos cânceres epiteliais, nos quais é frequentemente estudado como um fator promotor de fenótipos invasivos e de sinalização do microambiente.
Integrin β6/ITGB6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITGB6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITGB6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITGB6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITGB6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.