Inhibin β-B Plasmide Double Nickase (h): sc-402060-NIC

INHBB codifica la subunità beta B dell’inibina, che può omodimerizzare per formare l’activina B oppure eterodimerizzare con altre subunità della superfamiglia del TGF-β per modulare la segnalazione attraverso programmi trascrizionali dipendenti da SMAD2/3. L’equilibrio activina/inibina influenza il feedback endocrino, la funzione dei tessuti riproduttivi e, più in generale, il controllo della proliferazione e della differenziazione cellulare, dell’infiammazione e del rimodellamento della matrice extracellulare. La segnalazione dell’activina guidata da INHBB interseca vie che regolano lo sviluppo gonadico e la regolazione ipofisaria, e la letteratura ha collegato un’espressione alterata a un controllo della crescita e a un rimodellamento tissutale disregolati in contesti che includono disturbi riproduttivi e fenotipi associati al cancro. Queste caratteristiche rendono INHBB un bersaglio utile per studi meccanicistici sulle dinamiche di segnalazione della famiglia TGF-β e sulle risposte trascrizionali specifiche del contesto.

Inhibin β-B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus INHBB nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di INHBB. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di INHBB. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con INHBB interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.