Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-8RB Plasmide Double Nickase (h): sc-401404-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-8RB Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-8RB Double Nickase Plasmid (h) e il IL-8RB Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CXCR2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-8RB Antibody (E-2): sc-7304
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-8RB Plasmide Double Nickase (h) | sc-401404-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-8RB Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401404-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCR2 codifica IL-8RB, un recettore accoppiato a proteine G per le chemochine CXC ELR+ come CXCL8/IL-8, che regola la chemiotassi, l’adesione e l’attivazione dei neutrofili. Il legame del ligando innesca la segnalazione canonica dei GPCR tramite Gαi, flusso di calcio e le vie a valle PI3K–AKT, MAPK/ERK e PLCβ, integrando segnali che modellano il traffico infiammatorio e le interazioni endoteliali. IL-8RB è implicato nella regolazione delle risposte immunitarie innate, nei programmi angiogenici e di guarigione delle ferite e nel crosstalk con le reti di citochine all’interno dei tessuti infiammati. La segnalazione deregolata di CXCR2 è spesso oggetto di studio in contesti di infiammazione cronica e di infiammazione associata ai tumori, dove il reclutamento mieloide e i gradienti di chemochine influenzano il rimodellamento del microambiente.
IL-8RB Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CXCR2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CXCR2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CXCR2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CXCR2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.