IL-31 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-410448

Panoramica

IL31 umano codifica l’interleuchina-31 (IL-31), una citochina derivata dalle cellule T che segnala attraverso un complesso recettoriale eterodimerico (IL31RA e OSMR) per attivare le vie JAK/STAT, MAPK/ERK e PI3K/AKT. IL-31 modula le risposte delle cellule epiteliali e stromali, influenzando la produzione di chemochine, l’infiammazione di barriera e la comunicazione neuro-immune che contribuisce al prurito e al rimodellamento tissutale. Una segnalazione di IL-31 deregolata è stata associata a patologie cutanee infiammatorie e a infiammazione allergica delle vie aeree, ed è studiata come mediatore che collega l’immunità di tipo 2 con il prurito e con circuiti infiammatori cronici. Queste proprietà rendono IL31 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici sulla segnalazione guidata da citochine, sul cross-talk recettoriale e sulle interazioni immuno-epiteliali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-31 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IL31 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IL31 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IL31 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-31.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IL31 per lo studio della segnalazione di IL-31, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IL31 critici per la funzione di IL-31
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IL31 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-31 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IL-31 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IL31. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-31 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IL-31 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IL31 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IL31 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.