Plásmido Doble Nickase (m2) Il-28a: sc-437298-NIC-2
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m2)Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid (m2) y el plásmido de doble nickasa Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid (m22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ifnl2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m2) Il-28a | sc-437298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Gbp2b** codifica un miembro de la familia de proteínas de unión a guanilato, implicado en la inmunidad intrínseca celular impulsada por interferón, donde contribuye a la restricción antimicrobiana y a la coordinación de la señalización inmunitaria innata aguas abajo de las vías **JAK–STAT** y de los programas de genes estimulados por interferón. La proteína **Il-28a** (también conocida como **IFN-λ2**) es un interferón de tipo III que señaliza a través del complejo receptor **IFNLR1/IL10RB** para activar respuestas transcripcionales mediadas por **STAT1/STAT2–IRF9 (ISGF3)**, configurando las defensas antivirales epiteliales y de las mucosas y modulando redes de citocinas inflamatorias. La desregulación de estas vías es relevante para estudios de susceptibilidad viral, inmunidad de barrera y fenotipos inflamatorios crónicos, incluida la inflamación de las vías respiratorias y del tracto gastrointestinal. La edición génica de **Gbp2b** o **Il-28a** en modelos murinos permite la disección mecanística del crosstalk de interferones, de las interacciones patógeno-huésped y de los programas transcripcionales posteriores mediante desafíos de infección, transcriptómica y perfilado de células inmunitarias.
Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid El plásmido de doble nicasa (m2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ifnl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ifnl2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ifnl2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ifnl2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.