Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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IL-23 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-429901
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-23 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico IL-23, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-23 Antibody (C-3): sc-271279
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-23 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-429901 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il23a codifica la subunità p19 dell’interleuchina-23 (IL-23), una citochina eterodimerica che si associa a IL-12p40 per formare IL-23 e segnala attraverso il complesso recettoriale dell’IL-23, attivando le vie JAK/STAT, in particolare STAT3. Nelle cellule mieloidi, come cellule dendritiche e macrofagi, l’IL-23 integra gli input dei recettori di riconoscimento del patogeno per rafforzare i programmi infiammatori e promuovere l’immunità di tipo 17. L’IL-23 sostiene l’espansione e il mantenimento delle cellule Th17 e di altre popolazioni produttrici di IL-17, collegando il sensing innato alle risposte effettrici mediate da IL-17A/F e IL-22. Un’attività deregolata di Il23a/IL-23 è ampiamente utilizzata come asse meccanicistico nei modelli murini di patologie autoimmuni e infiammatorie, tra cui infiammazione intestinale, dermatite tipo psoriasica e autoimmunità del SNC.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-23 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Il23a in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Il23a insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Il23a a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-23.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Il23a per lo studio della segnalazione di IL-23, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Il23a critici per la funzione di IL-23
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Il23a per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal IL-23 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IL-23 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Il23a. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal IL-23 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IL-23 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Il23a per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Il23a definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.