IL-16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421091
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-16 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-16, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-16 Anticorpo (A-1): sc-374606
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421091 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Il16 de camundongo codifica a IL-16, uma citocina imunorreguladora produzida como um precursor pro-IL-16 e processada para gerar um mediador bioativo que atua como quimioatraente e modulador da ativação de leucócitos. A sinalização de IL-16 influencia o comportamento de células T e de fagócitos mononucleares ao moldar redes de citocinas, respostas migratórias e a comunicação célula–célula em tecidos inflamados. Por meio desses efeitos, a IL-16 contribui para a regulação do tráfego de células imunes e de programas de sinalização inflamatória relevantes para autoimunidade, inflamação alérgica e desregulação imune associada a infecções. Assim, a perturbação de Il16 é útil para dissecar mecanismos de polarização imune, recrutamento de leucócitos e remodelamento tecidual ligado à inflamação em sistemas de modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-16 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il16 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il16, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il16 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-16.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il16 para a investigação da sinalização de IL-16, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il16 críticos para a função IL-16
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il16 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-16 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il16. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-16 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-16 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il16 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il16 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.