IL-13Rα2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-402525-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IL-13Rα2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IL-13Rα2ダブルニカースプラスミド（h）およびIL-13Rα2ダブルニカースプラスミド（h2）は、IL13RA2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IL-13Rα2 抗体 (2K8): sc-134363
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IL-13Rα2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-402525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-13Rα2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-402525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトのIL13RA2は、II型サイトカインシグナル伝達を調節する高親和性のIL-13結合鎖であるIL-13Rα2をコードしており、制御性受容体コンポーネントとして機能することで、下流のJAK/STAT6関連転写プログラムを形成し得ます。IL-13の利用可能性と受容体複合体のダイナミクスを制御することを通じて、IL-13Rα2は、炎症、組織リモデリング、細胞外マトリックス制御に関連する上皮細胞および間質細胞の応答に影響を与えます。IL13RA2の発現変化は、慢性炎症性微小環境の状況や、IL-13応答性経路が細胞移動、浸潤、免疫相互作用に影響する複数の腫瘍タイプで報告されています。これらの特性により、IL13RA2は、ヒト細胞モデルにおいてサイトカイン受容体の生物学、受容体トラフィッキング、ならびに微小環境に駆動されるシグナル伝達表現型を解析するための有用な標的となります。
IL-13Rα2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IL13RA2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IL13RA2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IL13RA2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IL13RA2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。