
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
IL-1 beta/IL1B CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-400078-ACT | 20 µg | $397.00 |
IL1B는 염증을 촉진하는 사이토카인인 인터루킨-1 베타(IL-1β)를 암호화한다. IL-1β는 주로 활성화된 단핵구와 대식세포에서 생성되며, 인플라마좀 의존적 카스파아제-1 절단을 거쳐 성숙한 형태로 가공된다. IL-1β가 IL1R1과 IL1RAP을 통해 신호를 전달하면 MyD88 의존성 경로가 활성화되고, 이는 NF-κB 및 MAPK 연쇄반응으로 수렴하여 백혈구 모집, 발열, 급성기 반응에 관여하는 전사 프로그램을 유도한다. 이 축은 선천면역 활성화, 파이롭토시스와 연관된 염증성 출력, 그리고 IL-6 및 TNF와 같은 사이토카인과의 상호작용을 조절한다. IL1B 발현 및 인플라마좀 활성의 조절 이상은 여러 조직 맥락에서 만성 염증 및 자가면역성 병태, 대사성 염증, 종양 연관 염증과 관련되는 것으로 알려져 있다.
IL-1 beta/IL1B CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 IL1B 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
IL-1 beta/IL1B CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 IL1B 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 IL1B 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 IL-1 beta/IL1B 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 IL1B 위치를 보존하고 내인성 위치에서 IL-1 beta/IL1B 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 IL1B 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 IL-1 beta/IL1B 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.