IGFBP3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400682-LAC

IGFBP3（インスリン様成長因子結合タンパク質3）は分泌性の制御タンパク質で、IGF-IおよびIGF-IIに高親和性で結合し、IGFの生物学的利用能、受容体への結合、ならびに下流のPI3K–AKT経路およびMAPK経路のシグナル伝達を調節します。IGFの隔離（セクエストレーション）にとどまらず、IGFBP3は細胞外マトリックス成分や細胞表面／核内パートナーとの状況依存的な相互作用を介して、細胞周期制御、アポトーシス、細胞老化、ストレス応答にも関与します。その発現はホルモン性・炎症性の刺激によって動的に制御され、がん生物学、代謝異常、組織リモデリングといった場面でしばしば変化します。これらの特性により、IGFBP3はヒト細胞における増殖因子シグナル、増殖制御、ならびに微小環境依存的な表現型を解析するうえで有用な結節点（ノード）となります。

IGFBP3 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なIGFBP3の発現上昇を可能にします。

IGFBP3 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、IGFBP3転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性IGFBP3の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のIGFBP3ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。