IGF-1 Receptor α/β/IGF1R Plasmide Double Nickase (h): sc-400084-NIC

IGF1R codifica il recettore del fattore di crescita insulino-simile 1, una tirosin-chinasi recettoriale α/β unita da ponti disolfuro che trasduce i segnali IGF per regolare proliferazione, sopravvivenza, metabolismo e differenziamento. Il legame del ligando promuove l'autofosforilazione del recettore e il reclutamento delle proteine adattatrici IRS/SHC, attivando le vie di segnalazione PI3K–AKT–mTOR e RAS–RAF–MEK–ERK, coordinando la progressione del ciclo cellulare e le risposte anti-apoptotiche. L'attività di IGF1R interagisce con la segnalazione delle integrine e con la regolazione a feedback delle vie insulina/IGF, influenzando le risposte cellulari allo stress e i programmi di crescita anabolica. Una segnalazione di IGF1R deregolata è associata a trasformazione oncogenica, meccanismi di resistenza alle terapie e alterato controllo della crescita in molteplici contesti patologici, a supporto della sua utilità come nodo di via in studi meccanicistici.

IGF-1 Receptor α/β/IGF1R Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IGF1R nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IGF1R. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IGF1R. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IGF1R interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.