IFT88 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423378-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFT88O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IFT88 (m) e o Plasmídeo Double Nickase IFT88 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ift88. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFT88 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFT88 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ift88 codifica a proteína de transporte intraflagelar 88 (IFT88), um componente central do complexo IFT-B, necessário para a montagem do cílio primário e para o tráfego anterógrado ao longo do axonema. Em células de camundongo, a IFT88 sustenta a ciliogênese e vias de sinalização dependentes de cílios, incluindo Hedgehog e PDGFRα, que regulam proliferação, diferenciação e padronização tecidual. A disrupção de Ift88 compromete a dinâmica do centrossomo até o cílio, altera saídas de sinalização mecanossensorial e do desenvolvimento, e é amplamente utilizada para modelar defeitos na estrutura e na função ciliar. Assim, Ift88 é um alvo de alto valor para o estudo de ciliopatias e fenótipos relacionados, como desenvolvimento anormal de órgãos, alterações renais e esqueléticas e perturbações no padrão esquerda–direita em sistemas experimentais.
IFT88 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ift88 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ift88. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ift88. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ift88 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.