Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) HSP 56: sc-403455-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HSP 56 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HSP 56 Double Nickase (h) et le plasmide HSP 56 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FKBP4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HSP 56 Antibody (329.1): sc-100758
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HSP 56 | sc-403455-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HSP 56 | sc-403455-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP4 code l’immunophiline FKBP52 (HSP56), un co‑chaperon à domaine TPR qui s’associe aux complexes HSP90 afin de réguler le repliement, la stabilité et le trafic des protéines clientes. Il est surtout connu pour moduler la maturation des récepteurs des hormones stéroïdiennes et leur translocation nucléaire, reliant l’activité de chaperonnage aux voies de signalisation des récepteurs aux androgènes, aux glucocorticoïdes et à la progestérone. FKBP4 interagit également avec la machinerie de transport du cytosquelette et peut influencer les réponses cellulaires au stress via les réseaux de protéostasie. Un dérèglement de la fonction co‑chaperon FKBP4/HSP90 a été impliqué dans des altérations de la signalisation hormonale et de l’homéostasie protéique observées en biologie du cancer et dans la recherche sur la neurodégénérescence.
HSP 56 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FKBP4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FKBP4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FKBP4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FKBP4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.