hnRNP A/B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403454-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hnRNP A/BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase hnRNP A/B (h) e o Plasmídeo Double Nickase hnRNP A/B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HNRNPAB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:hnRNP A/B Anticorpo (G-10): sc-376411
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hnRNP A/B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403454-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP A/B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403454-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPAB codifica a ribonucleoproteína nuclear heterogênea A/B (hnRNP A/B), uma proteína de ligação a RNA que se associa a transcritos recém-sintetizados para coordenar o splicing do pré-mRNA, a estabilidade do mRNA e o transporte núcleo-citoplasmático. Ao interagir com complexos do spliceossomo e com conjuntos mais amplos de ribonucleoproteínas, a hnRNP A/B ajuda a moldar o repertório de isoformas de transcritos e programas de regulação gênica pós-transcricional ligados ao controle do ciclo celular e às respostas ao estresse. Alterações na atividade da família hnRNP e defeitos no processamento de RNA são frequentemente implicados em redes de expressão gênica desreguladas observadas em contextos de câncer e doenças neurodegenerativas, tornando o HNRNPAB um alvo útil para estudos mecanísticos do metabolismo de RNA. A perturbação funcional de HNRNPAB pode ser explorada para investigar consequências, em nível de via, de alterações de splicing e de decisões sobre o destino do RNA em células humanas.
hnRNP A/B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HNRNPAB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HNRNPAB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HNRNPAB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HNRNPAB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.