Plásmido Doble Nickase (h) Histone Deacetylase 9 (HDAC9): sc-401419-NIC

HDAC9 codifica la histona desacetilasa 9, una HDAC de clase IIa que actúa como correulador transcripcional sensible a señales, conectando la remodelación de la cromatina con las señales del entorno. HDAC9 se desplaza entre el núcleo y el citoplasma y modula programas de expresión génica mediante complejos que contienen HDAC, afectando el equilibrio de acetilación de histonas, la actividad de los potenciadores y la transcripción específica de linaje. Se integra con vías controladas por los factores de transcripción de la familia MEF2 y con mecanismos epigenéticos más amplios que regulan la diferenciación celular, el metabolismo y las respuestas al estrés. La expresión o actividad alteradas de HDAC9 se han asociado con redes transcripcionales desreguladas relevantes para la biología cardiovascular, la función de células inmunitarias y fenotipos oncogénicos, lo que la convierte en un objetivo útil para estudios mecanísticos de regulación epigenética.

Histone Deacetylase 9 (HDAC9) El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HDAC9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HDAC9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HDAC9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HDAC9 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.