Histone Deacetylase 7 (HDAC7) Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400989-NIC

HDAC7 codifica a histona desacetilase 7, uma HDAC de classe IIa que transita entre o núcleo e o citoplasma para regular a acessibilidade da cromatina e programas transcricionais de modo dependente de sinal. A HDAC7 atua em complexos correpressores e integra a sinalização de quinases dependentes de cálcio/calmodulina para modular a expressão gênica ligada à diferenciação celular, sobrevivência e à biologia imune e endotelial. Ao controlar os estados de acetilação em regiões regulatórias, a HDAC7 influencia vias que governam o comprometimento de linhagem e respostas inflamatórias, incluindo redes transcricionais associadas a MEF2. A atividade e a expressão desreguladas de HDAC7 têm sido associadas à regulação epigenética aberrante observada no câncer e em patologias cardiovasculares e relacionadas ao sistema imune, sustentando estudos mecanísticos do controle gênico dependente de cromatina.

Histone Deacetylase 7 (HDAC7) O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HDAC7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HDAC7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HDAC7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HDAC7 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.