HB-EGF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400795

개요

HBEGF는 헤파린 결합성 EGF 유사 성장인자(HB-EGF)를 암호화하며, HB-EGF는 막에 고정된 리간드로서 단백질분해에 의한 절단(shedding)으로 방출되어 EGFR/ERBB 계열 수용체를 통해 신호를 전달할 수 있습니다. HB-EGF는 하위 MAPK/ERK, PI3K–AKT 및 관련 유사분열·생존 경로를 활성화하여 상피 및 기질 세포의 증식, 이동, 상처 반응 프로그램을 조절합니다. 이 축은 종양 생물학, 염증성 리모델링, 혈관 및 심장 스트레스 반응을 포함해 비정상적인 EGFR 신호전달 맥락에서 자주 연구됩니다. 또한 HBEGF의 발현 역학은 ADAM 계열 금속단백분해효소 활성과, 조직 미세환경을 형성하는 파라크린/오토크린 성장인자 네트워크와도 교차합니다.

HB-EGF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HBEGF 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HBEGF 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HBEGF의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HB-EGF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HB-EGF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HBEGF 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HB-EGF 기능에 중요한 HBEGF 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HBEGF 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HB-EGF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HB-EGF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HBEGF 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HB-EGF HDR 플라스미드 (h) 및 HB-EGF HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HBEGF 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HBEGF 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.