Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HAP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405778
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HAP1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico HAP1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HAP1 Antibody (C-3): sc-166245
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HAP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405778 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
HAP1 (proteina 1 associata all’huntingtina) è una proteina citoplasmatica di scaffolding, particolarmente abbondante nei neuroni, che si lega all’huntingtina e coordina complessi di trasporto e di segnalazione. Contribuisce al trasporto mediato dai microtubuli, allo smistamento endosomiale e alla dinamica delle vescicole, influenzando il riciclo dei recettori e la crescita dei neuriti. HAP1 interagisce inoltre con regolatori del citoscheletro e con proteine motrici per modulare la distribuzione intracellulare di organelli e carichi. Alterazioni delle vie di trasporto e di proteostasi legate a HAP1 sono spesso studiate nel contesto dei meccanismi neurodegenerativi, inclusi i fenotipi di stress cellulare associati alla malattia di Huntington.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO HAP1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene HAP1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del HAP1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto HAP1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina HAP1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di HAP1 per lo studio della segnalazione di HAP1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni HAP1 critici per la funzione di HAP1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di HAP1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal HAP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal HAP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus HAP1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal HAP1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR HAP1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia HAP1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio HAP1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.