Date published: 2026-7-20

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Gβ 1慢病毒激活颗粒(m2): sc-420606-LAC-2

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
  • Gβ 1 慢病毒激活颗粒(m2)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,通过细胞慢病毒转导,特异高效地上调目的基因的表达
  • Gβ 1慢病毒激活颗粒(m2)包含以下SAM激活元素:一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了转录活化域VP64;一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
  • 一经转导,形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因,招募转录因子
  • 由 Gβ 1 慢病毒激活质粒 (m2) 和 Gβ 1 慢病毒激活质粒 (m22) 编码的 gRNA 靶向 Gnb1 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
  • 转染后,基因激活效率可以用抗体:Gβ 1 Antibody (F-2): sc-515764,通过WB、IF或IHC分析
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    Gβ 1慢病毒激活颗粒(m2)

    sc-420606-LAC-2
    200 µl
    $455.00

    小鼠Gnb1基因编码异源三聚体G蛋白β1亚基(Gβ1),它是GPCR信号传导的核心组分,需与Gγ亚基形成必需的二聚体以调控Gα活性,并将信号传递至腺苷酸环化酶、磷脂酶Cβ以及离子通道等效应器;通过这些相互作用,Gβ1协助协调第二信使动态、膜兴奋性以及包括MAPK/ERK在内的激酶级联反应,从而塑造细胞对神经递质、激素和感觉线索的应答;Gβ1依赖性信号的改变与神经发育和神经生理功能障碍研究密切相关,因为GPCR通路平衡的扰动会影响突触传递与神经网络活动;在小鼠模型中对Gnb1进行基因编辑或扰动,有助于借助cAMP/PLC读出、电生理以及磷酸化蛋白质组学分析等实验手段,机制性解析GPCR与效应器的耦联、信号偏向以及通路间串扰。

    Gβ 1 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Gnb1 表达。

    Gβ 1 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Gnb1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Gβ 1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Gnb1 基因组位点和调控架构。

    慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。