GSTO1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404107-LAC

Glutathion-S-Transferase Omega 1 (GSTO1) ist eine zytosolische Thioltransferase mit Deglutathionylase- und redoxmodulierenden Aktivitäten, die sie von kanonischen GST-Enzymen unterscheiden. Durch die Regulation glutathionabhängiger Entgiftungsreaktionen und des Protein-S-Glutathionylierungsstatus beeinflusst GSTO1 die zelluläre antioxidative Abwehr, entzündliche Signalwege und die Proteostase unter oxidativem Stress. Ihre Aktivität wurde mit der Modulation von Signalwegen in Verbindung gebracht, die die Handhabung reaktiver Sauerstoffspezies, den Xenobiotika-Stoffwechsel und redoxsensitive transkriptionelle Programme betreffen. Eine veränderte GSTO1-Expression oder -Funktion wird im Kontext von Neurodegeneration, kardiometabolischen Stressantworten und krebsassoziierter Redoxanpassung untersucht, bei denen Verschiebungen der Redoxhomöostase krankheitsrelevante Phänotypen prägen können.

GSTO1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente GSTO1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

GSTO1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der GSTO1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen GSTO1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen GSTO1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.