Glucose Transporter Glut6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406852

Panoramica

SLC2A6 codifica il trasportatore di glucosio Glut6 (GLUT6), un trasportatore facilitativo di esosi della famiglia SLC2 che supporta l’assorbimento cellulare di glucosio e la disponibilità di substrati metabolici. L’espressione di GLUT6 è arricchita nelle linee immunitarie ed ematopoietiche ed è sensibile ai segnali di attivazione, collegandola a cambiamenti nella glicolisi, nella fosforilazione ossidativa e in programmi immunometabolici più ampi. Grazie al suo ruolo nel controllo del flusso intracellulare di carboidrati, GLUT6 può influenzare l’equilibrio redox, le vie biosintetiche e nodi di segnalazione come AMPK e mTOR, che accoppiano lo stato nutrizionale alla crescita e alla sopravvivenza cellulare. Un’espressione deregolata di SLC2A6 è stata riportata in contesti infiammatori e in diversi tumori, stimolando studi meccanicistici su come un trasporto del glucosio alterato riorganizzi il metabolismo delle cellule tumorali e immunitarie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut6 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC2A6 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC2A6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC2A6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Glucose Transporter Glut6.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC2A6 per lo studio della segnalazione di Glucose Transporter Glut6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLC2A6 critici per la funzione di Glucose Transporter Glut6
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC2A6 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Glucose Transporter Glut6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Glucose Transporter Glut6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC2A6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Glucose Transporter Glut6 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Glucose Transporter Glut6 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC2A6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC2A6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.