Glucose Transporter Glut5 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-425193

Panoramica

Slc2a5 codifica il trasportatore di glucosio Glut5 (GLUT5), un trasportatore facilitativo di esosi con elevata specificità per il fruttosio, che media l’assorbimento apicale di fruttosio e contribuisce alla gestione dei carboidrati nell’epitelio intestinale e in altri tessuti. Regolando l’ingresso di fruttosio, GLUT5 supporta il metabolismo energetico cellulare e influenza il flusso glicolitico e le vie a valle della sintesi lipidica, collegando la disponibilità di nutrienti al rimodellamento metabolico. Un’alterata espressione di SLC2A5/GLUT5 è stata associata a fenotipi metabolici sensibili alla dieta ed è spesso analizzata in ambiti quali l’assorbimento intestinale, il metabolismo epatico e l’utilizzo dei nutrienti da parte delle cellule tumorali. Nei modelli murini, Slc2a5 rappresenta un nodo sperimentale maneggevole per studiare come il trasporto del fruttosio influenzi l’equilibrio energetico sistemico e lo stress metabolico del microambiente.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut5 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Slc2a5 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Slc2a5 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Slc2a5 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Glucose Transporter Glut5.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Slc2a5 per lo studio della segnalazione di Glucose Transporter Glut5, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Slc2a5 critici per la funzione di Glucose Transporter Glut5
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Slc2a5 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Slc2a5. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Glucose Transporter Glut5 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Glucose Transporter Glut5 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Slc2a5 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Slc2a5 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.