Glucose Transporter Glut2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400347

Panoramica

SLC2A2 codifica il trasportatore del glucosio 2 (GLUT2), un trasportatore facilitativo di esosi che media un flusso bidirezionale di glucosio attraverso la membrana plasmatica in modo dipendente dalla concentrazione. Nei tessuti umani, GLUT2 contribuisce al sensing dei nutrienti e all’omeostasi metabolica supportando l’assorbimento e il rilascio di glucosio e influenzando le vie a valle legate a glicolisi, gluconeogenesi e dinamiche di secrezione dell’insulina. Alterazioni nell’espressione o nella funzione di SLC2A2 sono state associate a una gestione disregolata del glucosio e a fenotipi metabolici, rendendolo rilevante per studi sulla biologia del diabete, sulla produzione epatica di glucosio e sulla funzione delle isole pancreatiche. Poiché GLUT2 può trasportare anche altri esosi, la perturbazione di SLC2A2 influisce su un utilizzo più ampio dei carboidrati e sull’equilibrio energetico cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC2A2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC2A2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC2A2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Glucose Transporter Glut2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC2A2 per lo studio della segnalazione di Glucose Transporter Glut2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLC2A2 critici per la funzione di Glucose Transporter Glut2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC2A2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Glucose Transporter Glut2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC2A2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Glucose Transporter Glut2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Glucose Transporter Glut2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC2A2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC2A2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.