Glucose Transporter Glut10 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-431260

Panoramica

Slc2a10 codifica per il trasportatore di glucosio GLUT10, un trasportatore facilitato di esosi che contribuisce alla gestione cellulare dei carboidrati e all’omeostasi redox nei tessuti del topo. GLUT10 è stato associato al trasporto intracellulare di glucosio o di deidroascorbato, collegando il flusso degli zuccheri alle vie antiossidanti che influenzano la funzione mitocondriale e il mantenimento della matrice extracellulare. Attraverso questi ruoli, Slc2a10 è rilevante per studi sull’adattamento metabolico, sulle risposte allo stress ossidativo e sulla biologia del tessuto connettivo vascolare. L’inattivazione genetica di Slc2a10 viene utilizzata per indagare i meccanismi alla base di fenotipi simili alla sindrome da tortuosità arteriosa, di un’alterata organizzazione di collagene/elastina e di un rimodellamento metabolico sensibile allo stress in modelli sperimentali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut10 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Slc2a10 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Slc2a10 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Slc2a10 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Glucose Transporter Glut10.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Slc2a10 per lo studio della segnalazione di Glucose Transporter Glut10, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Slc2a10 critici per la funzione di Glucose Transporter Glut10
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Slc2a10 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Glucose Transporter Glut10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Glucose Transporter Glut10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Slc2a10. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Glucose Transporter Glut10 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Glucose Transporter Glut10 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Slc2a10 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Slc2a10 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.