GILZ Plasmide Double Nickase (h): sc-401424-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GILZ Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GILZ Double Nickase Plasmid (h) e il GILZ Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TSC22D3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: GILZ Antibody (B-2): sc-515835
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GILZ Plasmide Double Nickase (h) | sc-401424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GILZ Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSC22D3 codifica la glucocorticoid-induced leucine zipper (GILZ), un regolatore trascrizionale inducibile che integra la segnalazione del recettore dei glucocorticoidi con programmi infiammatori e di risposta allo stress. GILZ modula l’espressione genica interagendo con fattori di trascrizione e nodi di segnalazione chiave, tra cui NF-κB e AP-1, influenzando così la produzione di citochine, l’attivazione delle cellule immunitarie e l’apoptosi. Nelle cellule umane, TSC22D3 è collegato alla regolazione delle risposte dei linfociti T, alla polarizzazione dei macrofagi e alla segnalazione infiammatoria dell’epitelio, collocandosi in vie rilevanti per l’omeostasi immunitaria e il rimodellamento tissutale. Un’espressione deregolata di GILZ è stata associata ad alterazioni dello stato infiammatorio e a cambiamenti dipendenti dal contesto nella sopravvivenza e nella differenziazione cellulare, studiati in modelli di biologia autoimmune, metabolica e oncologica.
GILZ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TSC22D3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TSC22D3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TSC22D3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TSC22D3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.