Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GFAP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400130-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GFAPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GFAP (h) e o Plasmídeo Double Nickase GFAP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GFAP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GFAP Anticorpo (2E1): sc-33673
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GFAP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400130-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GFAP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400130-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína ácida fibrilar glial (GFAP) é uma proteína de filamentos intermediários que atua como um dos principais componentes estruturais do citoesqueleto astrocitário e é amplamente utilizada como marcador de diferenciação de astrócitos e de gliose reativa. Ao organizar redes de filamentos e interagir com reguladores do citoesqueleto, a GFAP contribui para a morfologia dos astrócitos, a estabilidade mecânica e a resposta celular a lesões e a sinais inflamatórios. A dinâmica da GFAP se cruza com processos como remodelamento do citoesqueleto, migração celular e sinalização de estresse, que moldam a formação da cicatriz glial e as interações neuroimunes. A expressão alterada ou a agregação de GFAP está associada à disfunção astrocitária em contextos neurológicos e neurodegenerativos, incluindo a doença de Alexander e respostas mais amplas a lesões no SNC.
GFAP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GFAP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GFAP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GFAP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GFAP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.