GBP5 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403674

Panoramica

La guanilato-binding protein 5 (GBP5) è una grande GTPasi inducibile dagli interferoni che funge da effettore antimicrobico e immunoregolatorio nelle cellule dell’immunità innata. Partecipa ai programmi di segnalazione mediati dagli interferoni ed è stata collegata alla regolazione dell’inflammasoma, inclusa la modulazione della produzione di citochine della famiglia dell’IL-1 durante il riconoscimento dei patogeni. GBP5 contribuisce alle risposte di difesa dell’ospite contro i microbi intracellulari e modella reti di segnalazione infiammatoria che intersecano NF-κB e stati trascrizionali guidati dalle citochine. Un’espressione deregolata di GBP5 è stata associata a patologie infiammatorie e a firme di malattia correlate al sistema immunitario, rendendola rilevante per studi sull’attivazione mieloide, sulla biologia delle infezioni e sull’immunometabolismo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO GBP5 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene GBP5 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del GBP5 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto GBP5 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina GBP5.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di GBP5 per lo studio della segnalazione di GBP5, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni GBP5 critici per la funzione di GBP5
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di GBP5 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal GBP5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal GBP5 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus GBP5. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal GBP5 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR GBP5 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia GBP5 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio GBP5 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.