Plasmide Double Nickase (h) GAS41: sc-404113-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GAS41 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GAS41 Double Nickase (h) et le plasmide GAS41 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant YEATS4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GAS41 Antibody (C-10): sc-393708
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GAS41 | sc-404113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GAS41 | sc-404113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
YEATS4 code GAS41, une protéine nucléaire contenant un domaine YEATS, qui agit comme régulateur de la transcription et de l’organisation du génome associé à la chromatine. GAS41 participe au remodelage de la chromatine et à des processus liés à l’acétylation des histones via des interactions avec des complexes tels que SRCAP/TIP60, soutenant la dynamique des nucléosomes, le contrôle transcriptionnel et les réponses de la chromatine associées aux dommages de l’ADN. En influençant la progression du cycle cellulaire et les programmes d’expression génique, YEATS4/GAS41 a été associé à des phénotypes prolifératifs et à des variations du nombre de copies génomiques rapportées dans plusieurs types de tumeurs. Ces caractéristiques font de YEATS4 une cible utile pour étudier la régulation épigénétique, la signalisation dépendante de la chromatine et des réseaux transcriptionnels pertinents pour le cancer dans les cellules humaines.
GAS41 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus YEATS4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de YEATS4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de YEATS4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de YEATS4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.