G3BP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424175

Descripción general

G3bp1 codifica G3BP1, una proteína de unión a ARN que inicia el ensamblaje de los gránulos de estrés y coordina la selección y el destino de los ARNm durante el estrés celular. A través de interacciones con factores de iniciación de la traducción y componentes de señalización, G3BP1 conecta las respuestas al estrés con vías que regulan la estabilidad del ARNm, la señalización inmunitaria innata y la apoptosis, incluidas interacciones cruzadas con programas asociados a MAPK e interferón. En sistemas de ratón, G3BP1 se estudia con frecuencia por sus funciones en la restricción antiviral y la modulación de la señalización inflamatoria, así como por efectos más amplios sobre la proteostasis y las decisiones de destino celular. En modelos experimentales, la alteración de la dinámica de los gránulos de estrés que involucra a G3BP1 se ha asociado con fenotipos de neurodegeneración y relacionados con el cáncer, lo que respalda su relevancia para la investigación de mecanismos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO G3BP1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen G3bp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del G3bp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de G3bp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína G3BP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en G3bp1 para la investigación de la señalización de G3BP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de G3bp1 críticos para la función de G3BP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de G3bp1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido G3BP1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido G3BP1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus G3bp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR G3BP1 (m) y el plásmido HDR G3BP1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología G3bp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana G3bp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.